Mutant Taq polymerase for faster amplification

A process of conducting PCR, comprising:

• adding to a PCR mixture including a target sequence and target sequence primers, a mutant Taq polymerase having one or more of the following amino acid mutations at the positions in the even-numbered sequences, and wherein the remainder of the mutant polymerase has at least 80% amino acid sequence identity with wild type Taq polymerase, as shown in SEQ ID NO:
• 4 but wherein wild type Taq polymerase does not include the 6-membered histidine tag at its C-terminus and the six immediately preceding Glycine and Serine amino acids shown in SEQ ID NO:
• 4:
• G32P (SEQ ID NOS:
• 402-403),
• T34I (SEQ ID NOS:
• 408-409),
• E39K/E230K (SEQ ID NOS:
• 28-29), E39K/D320R (SEQ ID NOS:
• 30-31), E39K/E507K (SEQ ID NOS:
• 32-33), E39K/E520K (SEQ ID NOS:
• 34-35), E39K/E537K (SEQ ID NOS:
• 36-37), E39K/D578R (SEQ ID NOS:
• 38-39), E39K/D732R (SEQ ID NOS:
• 40-41), E39K/E742K (SEQ ID NOS:
• 42-43), E39K/E189K (SEQ ID NOS:
• 44-45),
• Q42R (SEQ ID NOS:
• 406-407),
• E101K (SEQ ID NOS:
• 46-47),
• V103S (SEQ ID NOS:
• 410-411),
• Y116A (SEQ ID NOS:
• 412-413),
• E117K (SEQ ID NOS:
• 48-49),
• E130K (SEQ ID NOS:
• 50-51),
• D144R (SEQ ID NOS:
• 6-7),
• E159K (SEQ ID NOS:
• 56-57),
• I163S (SEQ ID NOS:
• 404-405),
• E189C (SEQ ID NOS:
• 58-59), E189D (SEQ ID NOS:
• 60-61), E189K (SEQ ID NOS:
• 62-63),
• E189K/E230K (SEQ ID NOS:
• 64-65), E189K/E507K (SEQ ID NOS:
• 66-67), E189K/E537K (SEQ ID NOS:
• 68-69), E189K/D578R (SEQ ID NOS:
• 70-71), E189K/D732R (SEQ ID NOS:
• 72-73), E189K/E742K (SEQ ID NOS:
• 74-75),
• E189K/E230K/E537K (SEQ ID NOS:
• 76-77), E189K/E507K/E537K (SEQ ID NOS:
• 78-79), E189K/E520K/E537K (SEQ ID NOS:
• 80-81), E189K/E230K/E520K (SEQ ID NOS:
• 84-85), E189K/E230K/D578R (SEQ ID NOS:
• 86-87), E189K/E507K/D578R (SEQ ID NOS:
• 88-89), E189K/E230K/D732R (SEQ ID NOS:
• 90-91), E189K/E537K/D732R (SEQ ID NOS:
• 92-93), E189K/E507K/E520K (SEQ ID NOS:
• 94-95), E189K/E537K/D578R (SEQ ID NOS:
• 96-97), E189K/E537K/E742K (SEQ ID NOS:
• 98-99), E189K/D732R/E742K (SEQ ID NOS:
• 100-101),
• E189L (SEQ ID NOS:
• 102-103), E189M (SEQ ID NOS:
• 104-105), E189P (SEQ ID NOS:
• 106-107), E189Q (SEQ ID NOS:
• 108-109), E189R (SEQ ID NOS:
• 110-111), E189T (SEQ ID NOS:
• 112-113), E189W (SEQ ID NOS:
• 114-115),
• E201K (SEQ ID NOS:
• 116-117),
• E230C (SEQ ID NOS:
• 122-123), E230F (SEQ ID NOS:
• 124-125), E230H (SEQ ID NOS:
• 126-127), E230K (SEQ ID NOS:
• 128-129),
• E230K/E520K (SEQ ID NOS:
• 132-133), E230K/E537K (SEQ ID NOS:
• 134-135), E230K/D578R (SEQ ID NOS:
• 136-137), E230K/D732R (SEQ ID NOS:
• 138-139), E230K/E742K (SEQ ID NOS:
• 140-141),
• E230K/E507K/E520K (SEQ ID NOS:
• 142-143), E230K/E507K/E537K (SEQ ID NOS:
• 144-145), E230K/E520K/D578R (SEQ ID NOS:
• 146-147), E230K/E537K/D578R (SEQ ID NOS:
• 148-149), E230K/E537K/D732R (SEQ ID NOS:
• 150-151), E230K/E507K/E742K (SEQ ID NOS:
• 152-153), E230K/E520K/E742K (SEQ ID NOS:
• 154-155), E230K/E537K/E742K (SEQ ID NOS:
• 156-157), E230K/D578R/E742K (SEQ ID NOS:
• 158-159), E230K/D732R/E742K (SEQ ID NOS:
• 160-161),
• E230M (SEQ ID NOS:
• 162-163), E230N (SEQ ID NOS:
• 164-165), E230P (SEQ ID NOS:
• 166-167), E230Q (SEQ ID NOS:
• 168-169), E230R (SEQ ID NOS:
• 170-171), E230S (SEQ ID NOS:
• 172-173), E230T (SEQ ID NOS:
• 174-175), E230V (SEQ ID NOS:
• 176-177), E230W (SEQ ID NOS:
• 178-179), E230Y (SEQ ID NOS:
• 180-181),
• D320R (SEQ ID NOS:
• 184-185),
• L322S (SEQ ID NOS:
• 186-187),
• A323F (SEQ ID NOS:
• 188-189),
• R328D (SEQ ID NOS:
• 190-191),
• G330P (SEQ ID NOS:
• 192-193),
• R334D (SEQ ID NOS:
• 194-195),
• P336G (SEQ ID NOS:
• 196-197),
• E337K (SEQ ID NOS:
• 198-199),
• P338G (SEQ ID NOS:
• 200-201),
• Y339A (SEQ ID NOS:
• 202-203),
• D344R (SEQ ID NOS:
• 204-205),
• E347K (SEQ ID NOS:
• 206-207),
• A348F (SEQ ID NOS:
• 208-209),
• R349D (SEQ ID NOS:
• 210-211),
• L351S (SEQ ID NOS:
• 212-213),
• L361S (SEQ ID NOS:
• 214-215),
• L365S (SEQ ID NOS:
• 216-217),
• G366P (SEQ ID NOS:
• 218-219),
• P368G (SEQ ID NOS:
• 220-221),
• M374S (SEQ ID NOS:
• 222-223),
• L380S (SEQ ID NOS:
• 224-225),
• D381R (SEQ ID NOS:
• 226-227),
• P382G (SEQ ID NOS:
• 228-229),
• S383I (SEQ ID NOS:
• 230-231),
• N384R (SEQ ID NOS:
• 232-233),
• A391F (SEQ ID NOS:
• 234-235),
• A407F (SEQ ID NOS:
• 240-241),
• A414F (SEQ ID NOS:
• 242-243),
• E507Q (SEQ ID NOS:
• 270-271), E507R (SEQ ID NOS:
• 272-273), E507S (SEQ ID NOS:
• 274-275), E507T (SEQ ID NOS:
• 276-277), E507Y (SEQ ID NOS:
• 278-279),
• E507K/E520K (SEQ ID NOS:
• 246-247), E507K/E537K (SEQ ID NOS:
• 248-249), E507K/D578R (SEQ ID NOS:
• 250-251), E507K/D732R (SEQ ID NOS:
• 252-253), E507K/E742K (SEQ ID NOS:
• 254-255),
• E507K/E537K/D578R (SEQ ID NOS:
• 256-257), E507K/D578R/D732R (SEQ ID NOS:
• 258-259), E507K/E520K/E537K (SEQ ID NOS:
• 260-261), E507K/E520K/D578R (SEQ ID NOS:
• 262-263), E507K/E520K/E742K (SEQ ID NOS:
• 264-265), E507K/E537K/E742K (SEQ ID NOS:
• 266-267), E507K/D732R/E742K (SEQ ID NOS:
• 268-269),
• E520V (SEQ ID NOS:
• 282-283),
• E520K/E537K (SEQ ID NOS:
• 284-285), E520K/E537K/E742K (SEQ ID NOS:
• 300-301),
• E537A (SEQ ID NOS:
• 286-287), E537F (SEQ ID NOS:
• 288-289), E537I (SEQ ID NOS:
• 290-291), E537K (SEQ ID NOS:
• 292-293),
• E537K/D732R (SEQ ID NOS:
• 294-295), E537K/E742K (SEQ ID NOS:
• 296-297),
• E537K/D578R/D732R (SEQ ID NOS:
• 298-299),
• E537R (SEQ ID NOS:
• 302-303), E537Y (SEQ ID NOS:
• 304-305),
• L541S (SEQ ID NOS:
• 306-307),
• N565R (SEQ ID NOS:
• 308-309),
• T569A (SEQ ID NOS:
• 310-311),
• A570F (SEQ ID NOS:
• 312-313),
• S575I (SEQ ID NOS:
• 314-315),
• S577I (SEQ ID NOS:
• 316-317),
• D578F (SEQ ID NOS:
• 318-319), D578H (SEQ ID NOS:
• 320-321), D578R (SEQ ID NOS:
• 322-323), D578S (SEQ ID NOS:
• 8-9),
• D578R/D732R (SEQ ID NOS:
• 324-325), D578R/E742K (SEQ ID NOS:
• 326-327),
• D578V (SEQ ID NOS:
• 328-329),
• I584S (SEQ ID NOS:
• 330-331),
• N627R (SEQ ID NOS:
• 334-335),
• V631S (SEQ ID NOS:
• 336-337),
• H639E (SEQ ID NOS:
• 338-339),
• W645A (SEQ ID NOS:
• 340-341),
• T664I (SEQ ID NOS:
• 342-343),
• A675F (SEQ ID NOS:
• 344-345),
• S699I (SEQ ID NOS:
• 350-351),
• D732A (SEQ ID NOS:
• 354-355), D732C (SEQ ID NOS:
• 10-11), D732H (SEQ ID NOS:
• 14-15), D732K (SEQ ID NOS:
• 356-357), D732M (SEQ ID NOS:
• 358-359), D732P (SEQ ID NOS:
• 18-19), D732Q (SEQ ID NOS:
• 20-21), D732S (SEQ ID NOS:
• 22-23), D732T (SEQ ID NOS:
• 24-25), D732V (SEQ ID NOS:
• 364-365), D732Y (SEQ ID NOS:
• 366-367),
• D732R/E742K (SEQ ID NOS:
• 362-363),
• E742D (SEQ ID NOS:
• 370-371), E742F (SEQ ID NOS:
• 372-373), E742I (SEQ ID NOS:
• 376-377), E742K (SEQ ID NOS:
• 378-379), E742M (SEQ ID NOS:
• 380-381), E742N (SEQ ID NOS:
• 382-383), E742P (SEQ ID NOS:
• 384-385), E742T (SEQ ID NOS:
• 386-387), E742V (SEQ ID NOS:
• 388-389), E742Y (SEQ ID NOS:
• 390-391),
• E745K (SEQ ID NOS:
• 392-393),
• M751S (SEQ ID NOS:
• 394-395),
• R801D (SEQ ID NOS:
• 396-397),
• and
• E805K (SEQ ID NOS:
• 400-401);
• and
• amplifying the target sequence by temperature cycling to cause annealing of the primers to the target sequence and wherein conditions for extension of the primers are limited to one second or less, followed by deannealing of the extended primers.

A process of conducting PCR comprising:

• adding to a PCR mixture including a target sequence and target sequence primers, a mutant Taq polymerase having one or more of the following amino acid mutations at the positions E39K (SEQ ID NOS:
• 26-27);
• K131E (SEQ ID NOS:
• 52-53);
• E132K (SEQ ID NOS:
• 54-55);
• E209K (SEQ ID NOS:
• 118-119);
• E230A (SEQ ID NOS:
• 120-121);
• E315K (SEQ ID NOS:
• 182-183);
• E397K (SEQ ID NOS:
• 236-237);
• E401K (SEQ ID NOS:
• 238-239);
• V518A (SEQ ID NOS:
• 280-281);
• E626K (SEQ ID NOS:
• 332-333);
• E694K (SEQ ID NOS:
• 346-347);
• Q698R (SEQ ID NOS:
• 348-349);
• E708K (SEQ ID NOS:
• 352-353);
• D732G (SEQ ID NOS:
• 12-13);
• D732N (SEQ ID NOS:
• 16-17);
• and K804E (SEQ ID NOS:
• 398-399), wherein the remainder of the mutant polymerase has at least 80% amino acid sequence identity with wild type Taq polymerase, as shown in SEQ ID NO:
• 4 but wherein wild type Taq polymerase does not include the 6-membered histidine tag at its C-terminus or the immediately preceding 6 amino acids:
• GSGSSG, as in SEQ ID NO:
• 4;
• amplifying the target sequence by temperature cycling to cause annealing of the primers to the target sequence and wherein conditions for extension of the primers are limited to one second or less, followed by deannealing of the extended primers.